| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN60700259 |
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| 規格 | T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
細胞名稱 | 人腎皮質近曲小管上皮細胞HK-2 |
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貨物編碼 | BFN60700259 | ||
產品規格 | T25培養瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 1類 | ||
培養體系 | DMEM高糖培養基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人腎皮質近曲小管上皮細胞HK-2 細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞，通過導入HPV-16E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN16E6/E7轉染外生包裝細胞Psi-2，Psi-2細胞產生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317，最后將PA317產生的病毒顆粒導入正常的腎皮質近曲小管細胞。盡管pLXSN16E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。該細胞引種自ATCC CRL-2190 | ||
注釋 | Part of: Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) project. Transfected with: UniProtKB; P00552; Transposon Tn5 neo. Transformant: NCBI_TaxID; 333760; Human papillomavirus type 16 (HPV16) [E6/E7 (pLXSN)]. Omics: SNP array analysis.
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STR信息 | Amelogenin X (CCRID) X,Y (AddexBio; ATCC; KCLB) CSF1PO 13 D2S1338 17,25 D3S1358 16,17 D5S818 12 D7S820 10,11 D8S1179 10,14 D13S317 9 D16S539 11,12 D18S51 12 D19S433 15,15.2 D21S11 28,30 FGA 20,22 TH01 9 TPOX 8,9 vWA 17,18 | ||
參考文獻 | PubMed=22949125; DOI=10.1002/ijc.27822 Pawlowski R., Muhl S.M., Sulser T., Krek W., Moch H., Schraml P. Loss of PBRM1 expression is associated with renal cell carcinoma progression. Int. J. Cancer 132:E11-E17(2013)
PubMed=28489074; DOI=10.1038/ncomms15165 Sinha R., Winer A.G., Chevinsky M., Jakubowski C., Chen Y.-B., Dong Y., Tickoo S.K., Reuter V.E., Russo P., Coleman J.A., Sander C., Hsieh J.J., Hakimi A.A. Analysis of renal cancer cell lines from two major resources enables genomics-guided cell line selection. Nat. Commun. 8:15165-15165(2017)
PubMed=30894373; DOI=10.1158/0008-5472.CAN-18-2747 Dutil J., Chen Z., Monteiro A.N., Teer J.K., Eschrich S.A. An interactive resource to probe genetic diversity and estimated ancestry in cancer cell lines. Cancer Res. 79:1263-1273(2019)
PubMed=31068700; DOI=10.1038/s41586-019-1186-3 Ghandi M., Huang F.W., Jane-Valbuena J., Kryukov G.V., Lo C.C., McDonald E.R. III, Barretina J., Gelfand E.T., Bielski C.M., Li H., Hu K., Andreev-Drakhlin A.Y., Kim J., Hess J.M., Haas B.J., Aguet F., Weir B.A., Rothberg M.V., Paolella B.R., Lawrence M.S., Akbani R., Lu Y., Tiv H.L., Gokhale P.C., de Weck A., Mansour A.A., Oh C., Shih J., Hadi K., Rosen Y., Bistline J., Venkatesan K., Reddy A., Sonkin D., Liu M., Lehar J., Korn J.M., Porter D.A., Jones M.D., Golji J., Caponigro G., Taylor J.E., Dunning C.M., Creech A.L., Warren A.C., McFarland J.M., Zamanighomi M., Kauffmann A., Stransky N., Imielinski M., Maruvka Y.E., Cherniack A.D., Tsherniak A., Vazquez F., Jaffe J.D., Lane A.A., Weinstock D.M., Johannessen C.M., Morrissey M.P., Stegmeier F., Schlegel R., Hahn W.C., Getz G., Mills G.B., Boehm J.S., Golub T.R., Garraway L.A., Sellers W.R. Next-generation characterization of the Cancer Cell Line Encyclopedia. Nature 569:503-508(2019)
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驗收細胞注意事項
1、收到人腎皮質近曲小管上皮細胞HK-2細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到人腎皮質近曲小管上皮細胞HK-2細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止 3-5 小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人腎皮質近曲小管上皮細胞HK-2細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到 15％去培養。若細胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人腎皮質近曲小管上皮細胞HK-2細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML 培養基繼續培養：超過 80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000 轉/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于 37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時之需。
6、24 小時后，人腎皮質近曲小管上皮細胞HK-2細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入 3-5ml 培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2 培養。
特別提醒： 原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。
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