人胰島細(xì)胞NES2Y

簡要描述：青旗（上海）生物技術(shù)發(fā)展有限公司，總部位于上海浦東新區(qū)，依托本地高校資源，逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺(tái)，在標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞庫建立及細(xì)胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營原代細(xì)胞、細(xì)胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細(xì)胞和HPLC檢測(cè)等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對(duì)用戶負(fù)責(zé)的態(tài)度，以對(duì)科研的高度嚴(yán)謹(jǐn)，以嚴(yán)格的質(zhì)量控制，為廣大生物醫(yī)學(xué)科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)！

更新時(shí)間：2021-05-27

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

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詳情介紹

品牌	其他品牌	貨號(hào)	BFN607200613
規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	僅供科研	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

細(xì)胞名稱	人胰島細(xì)胞NES2Y
貨物編碼	BFN607200613
產(chǎn)品規(guī)格	T25培養(yǎng)瓶x1	1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量	1x10^6	1x10^6
保存溫度	27℃	-198℃
運(yùn)輸方式	常溫保溫運(yùn)輸	干冰運(yùn)輸
安全等級(jí)	1
用途限制	僅供科研用途 2類

培養(yǎng)體系	DMEM高糖培養(yǎng)基+20%FBS+1%三抗
培養(yǎng)溫度	37℃	二氧化碳濃度	5%
簡介	人胰島細(xì)胞NES2Y細(xì)胞提取于女性供體，為自發(fā)性永生化細(xì)胞系。
注釋	Registration: International Depositary Authority, European Collection of Cell Cultures (ECACC); 98081006. Characteristics: Insulin secreting. Characteristics: Has a loss of function of ATP-regulated potassium channels.
STR信息	/
參考文獻(xiàn)	PubMed=9280302; DOI=10.1016/S0014-5793(97)00874-0 MacFarlane W.M., Cragg H., Docherty H.M., Read M.L., James R.F.L., Aynsley-Green A., Docherty K. Impaired expression of transcription factor IUF1 in a pancreatic beta-cell line derived from a patient with persistent hyperinsulinaemic hypoglycaemia of infancy (nesidioblastosis). FEBS Lett. 413:304-308(1997) PubMed=10567373; DOI=10.1074/jbc.274.48.34059 MacFarlane W.M., Chapman J.C., Shepherd R.M., Hashmi M.N., Kamimura N., Cosgrove K.E., O'Brien R.E., Barnes P.D., Hart A.W., Docherty H.M., Lindley K.J., Aynsley-Green A., James R.F.L., Docherty K., Dunne M.J. Engineering a glucose-responsive human insulin-secreting cell line from islets of Langerhans isolated from a patient with persistent hyperinsulinemic hypoglycemia of infancy. J. Biol. Chem. 274:34059-34066(1999) PubMed=10866047; DOI=10.2337/diabetes.49.6.953 MacFarlane W.M., O'Brien R.E., Barnes P.D., Shepherd R.M., Cosgrove K.E., Lindley K.J., Aynsley-Green A., James R.F.L., Docherty K., Dunne M.J. Sulfonylurea receptor 1 and Kir6.2 expression in the novel human insulin-secreting cell line NES2Y. Diabetes 49:953-960(2000) Patent=US6372501 Aynsley-Green A., Lindley K.J., Docherty K., Dunne M.J., MacFarlane W.M., James R.F.L. Glucose responsive beta-cell line. Patent number US6372501, 16-Apr-2002 PubMed=21099259; DOI=10.4161/isl.1.2.9432 Adams G.G., Uddin A., Vives-Pi M., Pujol-Borrell R., James R.F.L. Characterisation of the NES2Y cell line and its use in the production of human glucose-responsive insulin producing (hGRIP) cell lines by cell-cell fusion. Islets 1:117-123(2009)

驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)

1、收到人胰島細(xì)胞NES2Y細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。

2、收到人胰島細(xì)胞NES2Y細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。

3、收到人胰島細(xì)胞NES2Y細(xì)胞后，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右，血清濃度還是在 10％。

4、收到人胰島細(xì)胞NES2Y細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時(shí)之需。

6、24 小時(shí)后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn)）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見細(xì)胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過稀，有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。